卵子的奥援，卵母辅助激活解救ICSI反复受精失败

有人在巢内生育咨询后台留言说，既是使用单精子卵浆内注射（ICSI）治疗，仍然反复受精失败。巢医生回答你，这主要是卵母细胞激活失败造成的。采用人工辅助卵母细胞激活可以提高ICSI的受精率，有望为ICSI周期反复受精失败或受精率低的夫妇带来福音。







卵子的灵魂救助



新生命始于受精，受精始于卵子激活，卵子激活始于“精-卵接触（动激之吻）”和“精-卵融合（灵魂交集）”。体外授精（IVF）技术大大缩短了精子和卵子的时空距离，为她们提供了鹊桥相会的优美时机。一旦IVF技术受精失败，则需要进一步借助卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)，以帮助“精/卵”两者直接完成“肉体”和“灵魂”的融合。



可是在ICSI治疗周期中仍然有部分患者（1%～3%）受精失败。过去只能隔“岸”相望，老死不相往来。近年来逐渐发展起来的卵母细胞辅助激活(AOA)技术，在改善ICSI后受精失败患者的妊娠结局方面取得了明显效果，已经成为治疗不孕不育的重要手段。









一、什么是卵母细胞激活



卵母细胞激活是成功受精的必须环节。成熟的人类卵母细胞停滞于第二次减数分裂中期（MⅡ期），只有在精子或某些理化因素的刺激下，卵母细胞才能恢复并完成减数分裂，这一过程称为卵母细胞激活。简单的说就是卵子需要精子或某些理化因素的激活来完成受精的过程。





卵母细胞激活伴随着一系列重大事件的发生，包括Ca2 震荡、皮质反应、第二极体排出、雌雄原核形成、母源性RNA募集、启动DNA合成等，其中以第二极体排出和雌雄原核形成作为激活成功的标志。



精子需触发卵母细胞内的Ca2 震荡来激活卵子，圆头畸形精子患者，或低受精率患者的精子即使ICSI注射到卵母细胞内，也很难引发卵母细胞出现Ca2 震荡，所以不能完成受精过程。



对于这种ICSI后卵子不受精的情况，该怎样继发精卵的“灵魂震荡”呢？







二、卵母细胞怎么辅助激活？



对于ICSI受精失败的患者，在下一个取卵周期中，先在体外完成常规的ICSI操作，30分钟后，再行卵母细胞辅助激活。



常见的辅助激活方法包括：




1）物理法（如电激活等）；



2）化学法（如Ca2 载体A23187、SrCl2、离子霉素、放线菌酮、乙醇、二甲基氨基嘌呤激活等）。


1、物理激活：电激活


电激活是经典的物理激活方法，接通直流电通过卵母细胞，击穿卵母细胞膜，在其上留下很多小孔，在短时间内引起细胞胞外Ca2 内流到细胞内，使得细胞胞内Ca2 浓度升高。与化学激活相比，电激活没有潜在的细胞毒性和致畸性，具有较高的安全性。但是，电激活过程中，卵母细胞内会产生超氧化物，对形成的胚胎产生不利影响。



2、化学激活


是将卵母细胞暴露在化学试剂中，使卵母细胞内Ca2 水平升高。在众多激活剂中，A23187和离子霉素常应用于临床。氯化锶（SrCl2）在小鼠上已见成效，但在人类中使用该化学激活剂仍存在争论。



据报道物理激活法成功率都低于化学激活化方法。在我们生殖中心，我们采用目前使用较成熟的A23187处理，对受精率有明显改善作用。







3、Ca2 载体A23187


Ca2 载体A23187是一种广泛应用传递的化学激活剂，能够高度选择性结合Ca2 ，穿过细胞膜将Ca2 运输到胞质内，提高胞质内的Ca2 浓度，产生Ca2 震荡。



三、辅助激活技术安全吗？



关于任何一项人类辅助生殖技术，关于安全性的讨论从来没有停止过。现在已经证明，离子霉素等化学激活对小鼠胚胎着床前后的发育没有显著影响，出生小鼠健康且具备正常的生育力。与此同时，多个生殖中心开始研究卵子激活对出生儿童的影响，调查结果显示，这些儿童在神经发育和行为表现等方面与常规出生小孩没有明显差异。虽然现有的证据均表明AOA对胚胎发育及胎儿生理心理都没有显著影响，但是由于样本量有限，还有待于后续扩大样本量进一步论证。