验孕棒的主要工作原理是检测人体尿液中的HCG，即人绒毛膜促性腺激素。
HCG是怀孕女性体内分泌的激素，在于尿液及血液中，一般在怀孕之后的6-7天开始升高。但是刚怀孕时检测不出来，一般需要等到月经推迟一周之后再做检测，阳性概率较大。
一般利用晨尿来检测是否怀孕。取尿样之后，将验孕棒的检测部位放入尿样中5秒左右拿出放平，在5分钟之后就可以查看结果，有的验孕棒需要15分钟。
验孕棒结果中显示两杠是怀孕，显示一杠是未怀孕，若没有红杠则为验孕棒失效。值得注意的是，验孕棒的结果不是完全准确的，需要再去医院检查血液HCG。